生物安全柜的选择
购买生物安全柜时应考虑所提供的生物防护作用是针对操作人员个人的还是针对实验样品的；若是针对操作人员的防护应明确是针对病原微生物的还是针对有毒化学物质或两者兼而有之。若是针对病原微生物的还应强调微生物的生物危害级别；若是针对有毒化学物质的可按照以下原则作选择：I级或Ⅱ级A型生物安全柜中不进行挥发性或毒性化学物质操作。Ⅱ级B1型生物安全柜只可用于少量的挥发性或毒性化学物质的操作，如要进行一定量的挥发性或毒性化学物质的操作必须使用Ⅱ级B2型生物安全柜。不同型别的生物安全柜排气特点不同。
1.安放
进入生物安全柜的空气速率约是0.45 m／s，按照这种速率，气流的完整性很容易受附近人员的走动、窗户的开关、门的开启和关闭、空调运行等因素的影响。为避免上述因素的干扰，生物安全柜应放在远离人员活动、物品流动以及可能会扰乱气流的地方。为了方便起见，应在安全柜的后面、左右两侧面各留30cm的空间，以利于安全柜的维护。上端应留30～35cm空间，以便准确测量空气通过排风过滤器的速度及排风过滤器的更换。
2.操作人员
使用生物安全柜时，操作人员手臂的伸入或取出时应缓慢，垂直于前端开口处，从而保证安全柜前端气流的完整性。应在手或胳膊伸入柜中1min后开始操作，以便安全柜对手或胳膊表面的空气进行净化处理。实验所需器材应一次性放人生物安全柜，尽量减少或限制操作人员手在安全柜中的进出次数。
3.实验材料的放置
Ⅱ级生物安全柜前端开口处严禁被纸张、设备或其他物品覆盖。物品放人生物安全柜后，表面要用70％的乙醇擦拭。柜内应备有一块浸过消毒剂的毛巾，以便蘸吸溅出的液体。实验材料尽量放在柜的后面，笨重的物品放在一边，产生气溶胶的物品也应放在柜的后面。实验器材应按顺序从清洁的排放到污染的。污染的实验材料不应随时拿出柜外，操作者的手也不应频繁地进出安全柜。
4.操作和维持
大多数的生物安全柜设计成一天24h开机，调查发现连续开机有利于控制实验室灰尘和粒子。Ⅱ级A型不用时可以关闭。Ⅱ级B型在使用时要保持实验室空气平衡，因此一天中若有数个操作过程，其间不应中断运行。实验开始前5分钟就应启动生物安全柜，净化局部空气。使用中若出现任何故障均应及时向上级人员报告并请专职技术人员维修。
5.紫外线
生物安全柜中不需要紫外灯。假如要用，每周应对灯管作清洁，除去尘埃，保证杀菌效果，定期监测紫外灯的辐射强度，要防止紫外线对眼睛或皮肤的灼伤。
6.明火
生物安全柜内近似无菌的环境中应避免使用明火，一方面它可干扰气流运行，其次，若操作中使用挥发性或易燃物质时会造成危险。操作时需用接种环的，尽可能地用一次性的塑料接种环，使用金属接种环的应该用微型燃烧器或电炉灭菌而不应该使用明火。
7.溢出
在实验室工作的每一个人都应熟知含微生物的样品溢出时的处理程序。一旦生物安全柜中发生有生物危害的物品溢出时，应在安全柜处于工作状态下立即进行清理。要使用有效的消毒剂，并在处理过程中尽可能减少气溶胶生成。实验完毕后，柜中所有接触病原体的材料均应作消毒灭菌处理。
8.清洁和消毒
工作完毕后，柜中所有的物品都应清 除表面污染并移出柜外，柜内工作台表面和柜的内壁应用含氯石灰(漂白粉)或70％乙醇消毒。若用腐蚀性的化学剂消毒后还应用灭菌水再擦洗。关机前应运行5分钟，以便对残留气体进行净化。
9.清除污染
滤膜更换之前生物安全柜要由专业人员用甲醛熏蒸消毒。
10.个人防护设施
使用生物安全柜的操作人员应穿工作服。在生物安全1～2级实验室中工作的人员可穿普通的工作服；在3～4级实验室工作的人穿反背式实验隔离衣具有更好的保护效果。手套应能包住腕关节上的防护服。有些操作可能要戴口罩和眼罩。
